一杯清酒邀明月
天下本无事,庸人扰之而烦耳。

13、高级功能:Z-Stack、Tiles、Time Series(该篇目之前的流程每次都要做)

(2)Tiles

在“Tiles”模块下“Tiles”方法代表以当前视野为中心拍摄拼图, 适合样品较大一个视野拍不下时需要拍下全貌的场景。

1、选择“Tiles”下的“Tiles”方法;

2、“X”&“Y”分别代表水平和垂直方向拼图范围(3 * 3 或者 3 * 4 都可以);

3、点击“+”,将要拼图的范围添加到拼图区域中;

4、“Start Experiment”(高级功能拍摄照片都是点击它);

 “Tiles”方法代表以当前视野为中心拍摄拼图

5、拍摄完成后,因为拼图衔接部分有拼痕,因此需要对图片进行进一步处理。

左上角“Processing”下面“Method”这一栏,选择“Stitching”;

 “Method”这一栏选择“Stitching”

接着下拉到“Parameters”参数,点击“New Output”新生成图片,再 √ 上“Fuse Tiles”去掉拼痕,最后点击上方的“Apply”。

 Parameters

“Stake”方法能够通过定义拼图边缘自动计算拼图大小完成拼图,适合不确定需要多少张拼图足够拍下全貌的场景,可以一边预览一边调节拍摄范围。

1、“Stake”下通过移动载物台到想拼接的样品边缘,单击“+”,添加边缘范围。所有边缘定义后,点击“Done”,软件自动定义拼图范围(下图中例子显示总共需要拍 8 个 Tiles);

2、“Start Experiment”;

3、去拼痕处理同上。

 “Stake”方法能够通过定义拼图边缘自动计算拼图大小

高级拼图功能“Advanced Setup”主要包括两个部分:

· 可以通过拼图前分析拼图区域的焦距变化,有利于校正拼图不同焦距的问题(support point);

· 如果同时配置有 CCD,可以通过 CCD 的快速成像来获取预扫图像,辅助拼图区域的选择(preview scan)。

1、建立好拼图范围后选择“Advanced Setup”,在右侧看见扫描区域,并进入下方选项“Support Points”;

 建立好拼图范围后选择“Advanced Setup”

 进入“Support Points”选项

2、在“Support Points”选项下选择支持点,这些支持点将帮助你确定拼图区域内的焦距变化;设定好需要分布的支持点的行列数量后点击“Distribute Support Points on Selected Tile Regions”。

 

点击“Distribute Support Points on Selected Tile Regions”

拼图区域上出现黄色小圆点,代表支持点,可以手动调节这些点的具体位置。

 拼图区域上出现黄色小圆点

3、在“Tiles”窗口下选择“Focus Surface(verify) ”,点击“Verify Tile Regions / Positions”对选好的 support points 进行校正;

4、根据配置不同,主要包括以下三种校正方法:

a. None(Manual adjustment)手动校正,在预览模式“Live”下,双击第一个 SP(Support Point)进行手动调焦后保存焦距位置“Set Z & Move to Next”,随后对后续 SP 进行逐个校正;

b. Autofucus(AF)软件自动对焦,通过软件计算的方法找到最佳焦距;

c. Definite Focus(DF)自动对焦系统,需要硬件 Definite Focus 支持,通过 DF 能够迅速找到介质表面来确定样品焦面。

 Verify Support Points

5、选择 AF 校正方法后选择“Use AF to Verify the Remaining”,软件会自动对所有 Support Points 进行焦距校正;

 Autofocus Verify Support Points

6、选择 DF 校正方法后,

① 选择第一个”Support Point”点,点击“Move to Current Point”;

② 选择“Run DF and Set Z”,等待 Definite Focus 矫正结果;

③ 最后选择“Use DF to Verify the Remaining”,软件会自动对所有 Support Points 进行焦距校正。当校正 SP 结束后,选择“Close”关闭 Verify 窗口。

 Definite Focus Verify Support Points

7、校正所有 SP 后,选择适合的“Interpolation Degree”;样品表面越不平整需要 Interpolation Degree 越高,选择的 SP 数量超过 Interpolation Degree 需要的最小值可以增加计算的可靠程度。

 Definite Focus Verify Support Points

 Definite Focus Verify Support Points

8、随后在“Focus Strategy”工具栏中确定如上图所示选项:对焦方法为“Use Focus Surface / Z Values Defined by Tiles Setup”, Focus Surface 的方法为“Local (per Region/Position)”;

9、上述设置结束后,点击“Start Experiment”拼图。

 Definite Focus Verify Support Points

posted on 2023-06-29 16:36  一杯清酒邀明月  阅读(565)  评论(0编辑  收藏  举报