蔡司激光共聚焦荧光显微镜 (四)

10、图像处理

（1）图像下面“Graphics”里面，第一排是比较常用的小工具。

 “Graphics”比较常用的小工具

①第一个虚线框的作用是截图，选中区域后点一下鼠标右键，点“Create Subset Images from ROI”。点完后会新生成一张图像。（截图会造成像素损失）

· 如不想像素损失，还有另一方法：

“Acquisition Mode”里有个“Crop”按钮，点击“Crop”后可设置想重拍的区域，可放大缩小，还可 360° 旋转角度。点击“Snap”重新拍一张。

②第二个“T”是直接在图像打上文本。

③第三个加标尺，点击它图像右下方出现一个标尺，可随意移动、拉长，缩短。

· 标尺换颜色：先选中标尺图层，点击上面“Format”弹出一个框，可在框内改，图像实时修改。设置好后点击“Set As New Global Default”修改默认值。

④“箭头”选中直接在图像上画一个即可。

⑤矩形 ⑥圆形 ⑦不规则

实线框且闭合，测量小工具。

选中区域后会标识出面积和 3 个荧光通道的平均灰度值。

· 如想导出测量结果，选择图像左侧“Measure”，图像右边出现一个 table，先点击下面“Create Document”生成 document 直接“Save”弹出的新窗口，保存格式 CSV 或 xml。

（2）亮度与对比度的微调

· 适用：信号很弱，背景跟信号分得不是特别清楚，或者整个图像都很弱。

· 操作步骤：图像下边有个“Display”，这里主要调节两条竖线。右边竖线往左拖，图像会变得越来越亮，左边竖线往右拖，图像对比度会越来越强，越来越清楚。

 “Display”调节两条竖线

· 调节“Display”后，图像上述灰度值不会有变化，因为“Display”调节的只是显示的亮度，而不是实际的亮度，实际亮度在拍摄完成之后就已经确定了。因此，如果需要做量化、测量和比较，不建议调节“Display”，除非两张图的“Display”调得一模一样。