7、准备拍摄
(1)Frame Size 分辨率:图像越大,分辨率提高,但扫描时间越长。
一般杂志要求是 1k*1k 左右,即“1024*1024”,更高 2048 或 4096,或者直接用“Optimal”系统认为最佳分辨率。
(2)调节信噪比的两个参数:Scan Speed,Averaging
①Scan Speed:扫描速度越慢,信噪比越好,但光漂白越多;
建议设置为 5-8;4 勉强可以,不建议更低,一方面是图像拍太慢,另一方面对信号有一定的漂白(拍完一张后面就没法再拍这个地方了);
②Averaging:主要功能——降噪
Number:2/4
(增加 Averaging 次数可以减少噪音,但会增加扫描时间)
Acquisition Mode
8、点击“Snap”拍照
激光共聚焦是从上到下一点点扫下来的,“Direction”可以把单向改成双向,速度会快一倍。
点击“Snap”拍照
9、图像保存
- 组会/放文章:Tiff 格式
- 原始文件:czi 格式(可以用 ZEN 软件打开)
右击图像标签,图像保存为”czi”格式
左上方“Save”,存到合适的位置。
一定要先存原始图片!不要直接下拉选择 Tiff,这样存的图像没有颜色。
- 原始文件非常重要!
如忘加标尺,可打开 czi 重新加。
如下次还要用相同的参数拍,可以通过“Experiment Manager”来保存拍摄的参数,或打开原始文件点击图像(czi格 式)下边“reuse”,这样该文件的参数会回到左边参数栏。
Experiment Manager and Reuse
建议拍一张存一张。如未存,下一个视野会被上一张图像覆盖。
- 左边“Information”里有很多信息。