蔡司激光共聚焦荧光显微镜 (三)

7、准备拍摄

（1）Frame Size 分辨率：图像越大，分辨率提高，但扫描时间越长。

一般杂志要求是 1k*1k 左右，即“1024*1024”，更高 2048 或 4096，或者直接用“Optimal”系统认为最佳分辨率。

（2）调节信噪比的两个参数：Scan Speed，Averaging

①Scan Speed：扫描速度越慢，信噪比越好，但光漂白越多；

建议设置为 5-8；4 勉强可以，不建议更低，一方面是图像拍太慢，另一方面对信号有一定的漂白（拍完一张后面就没法再拍这个地方了）；

②Averaging：主要功能——降噪

Number：2/4

（增加 Averaging 次数可以减少噪音，但会增加扫描时间）

 Acquisition Mode

8、点击“Snap”拍照

激光共聚焦是从上到下一点点扫下来的，“Direction”可以把单向改成双向，速度会快一倍。

 点击“Snap”拍照

9、图像保存

• 组会/放文章：Tiff 格式
• 原始文件：czi 格式（可以用 ZEN 软件打开）

 右击图像标签，图像保存为”czi”格式

左上方“Save”，存到合适的位置。

一定要先存原始图片！不要直接下拉选择 Tiff，这样存的图像没有颜色。

• 原始文件非常重要！

如忘加标尺，可打开 czi 重新加。

如下次还要用相同的参数拍，可以通过“Experiment Manager”来保存拍摄的参数，或打开原始文件点击图像（czi格 式）下边“reuse”，这样该文件的参数会回到左边参数栏。

 Experiment Manager and Reuse

建议拍一张存一张。如未存，下一个视野会被上一张图像覆盖。

• 左边“Information”里有很多信息。