显微成像（光学） - 随笔分类 - 一杯清酒邀明月

显微镜的几个概念:分辨率，放大率，最大分辨率，分辨极限

摘要：“本文主要介绍有关显微镜的一些重要概念，不论是在科研，还是日常生活当中，这些概念都十分容易混淆。分辨这些概念有助于我们避免误解，更好、更合理地使用显微镜。” 01 分辨率分辨率是指能够分辨出的相邻两个物点间的最小距离的能力，这种距离称为分辨距离。一般来说分辨距离越小，分辨率越高。一般规定：显微镜阅读全文

posted @ 2023-08-23 16:26 一杯清酒邀明月阅读(1188) 评论(0) 推荐(0) 编辑

显微镜分辨率：概念、因素和计算

摘要：在显微镜学中，‘分辨率’一词用于阐述显微镜对细节进行区分的能力。换言之，这是样本内两个能被观察人员或者显微镜摄像头区分的实体点之间的理想的距离。显微镜的分辨率本质上与光学元件的数值孔径（NA）以及用于观察样本标本的光波长有关。此外，我们必须考虑Ernst Abbe于1873年首次提出的衍射极限。阅读全文

posted @ 2023-08-23 16:24 一杯清酒邀明月阅读(395) 评论(0) 推荐(0) 编辑

景深的原理

摘要：首先什么是景深？对于光学系统而言，由于像差的限制，点物很难成点像，加上衍射受限，会形成一个弥散斑。但幸好，人眼也不够高级。对于照相物镜来说，若照片上各点的弥散斑对人眼的张角小于人眼极限角分辨率1~2'，则感觉犹似点像。所以人仍然会认为图像是清晰的。故当镜头对着处于焦面物体拍摄时，被摄物体与其前阅读全文

posted @ 2023-08-23 15:34 一杯清酒邀明月阅读(350) 评论(0) 推荐(0) 编辑

蔡司激光共聚焦荧光显微镜 (八)

摘要：13、高级功能：Z-Stack、Tiles、Time Series（该篇目之前的流程每次都要做）（3）Time Series 1、选择“Time Series”； 2、Duration 设置拍摄要持续的时间，有多个单位可选择，如循环数 Cycles 或者其他具体时间； 3、循环之间的间隔 Inte 阅读全文

posted @ 2023-06-29 16:38 一杯清酒邀明月阅读(234) 评论(0) 推荐(0) 编辑

蔡司激光共聚焦荧光显微镜 (七)

摘要：13、高级功能：Z-Stack、Tiles、Time Series（该篇目之前的流程每次都要做）（2）Tiles 在“Tiles”模块下“Tiles”方法代表以当前视野为中心拍摄拼图，适合样品较大一个视野拍不下时需要拍下全貌的场景。 1、选择“Tiles”下的“Tiles”方法； 2、“X”&“ 阅读全文

posted @ 2023-06-29 16:36 一杯清酒邀明月阅读(581) 评论(0) 推荐(0) 编辑

蔡司激光共聚焦荧光显微镜 (六)

摘要：13、高级功能：Z-Stack、Tiles、Time Series（该篇目之前的流程每次都要做）（1）Z-Stack Z-Stack 即 3D 成像，有两种模式。主要使用“First / Last”模式，通过上下边界决定 3D 成像的 Z 轴范围；另一种是“Center”模式，主要通过设定 Z 轴阅读全文

posted @ 2023-06-29 16:33 一杯清酒邀明月阅读(1480) 评论(0) 推荐(0) 编辑

蔡司激光共聚焦荧光显微镜 (五)

摘要：11、导出能发表文章的格式 · 软件左上方“File”的“Export / Import”导出或导入的“Export”，界面自动跳到图像处理“Processing”这个界面，且自动在“Method”里面选到“Image Export”。 · 往下有参数设置“Parameters”，可以在“Filet 阅读全文

posted @ 2023-06-29 16:31 一杯清酒邀明月阅读(747) 评论(0) 推荐(0) 编辑

蔡司激光共聚焦荧光显微镜 (四)

摘要：10、图像处理（1）图像下面“Graphics”里面，第一排是比较常用的小工具。 “Graphics”比较常用的小工具 ①第一个虚线框的作用是截图，选中区域后点一下鼠标右键，点“Create Subset Images from ROI”。点完后会新生成一张图像。（截图会造成像素损失） · 如不想阅读全文

posted @ 2023-06-29 16:30 一杯清酒邀明月阅读(474) 评论(0) 推荐(0) 编辑

蔡司激光共聚焦荧光显微镜 (三)

摘要：7、准备拍摄（1）Frame Size 分辨率：图像越大，分辨率提高，但扫描时间越长。一般杂志要求是 1k*1k 左右，即“1024*1024”，更高 2048 或 4096，或者直接用“Optimal”系统认为最佳分辨率。（2）调节信噪比的两个参数：Scan Speed，Averaging 阅读全文

posted @ 2023-06-29 16:28 一杯清酒邀明月阅读(668) 评论(0) 推荐(0) 编辑

蔡司激光共聚焦荧光显微镜 (二)

摘要：6、每一个通道进行预览，然后调节相应参数（1）先选中一个通道，例如“mCherry"，再点击左上角“Live”图像预览；（2）可以通过鼠标双击的方式进行调焦或者调节视野位置。 · 比如把靠上的圈圈调到视野中间，双击圈圈，它会自动到整个预览视野的中间位置。 · 比如调节焦距，按住 Ctrl，调节鼠阅读全文

posted @ 2023-06-29 16:27 一杯清酒邀明月阅读(839) 评论(0) 推荐(0) 编辑

蔡司激光共聚焦荧光显微镜 (一)

摘要：普通显微镜成像与共聚焦显微镜成像？普通显微镜成像共聚焦显微镜成像 1、开机顺序：1→2→3→4→5→6→7 ①②——控制器，通电电源 ③——激光器开关（转动钥匙） ④——汞灯电源（开关间隔 30min以上）金属卤化物灯“X-cite 120” 金属卤化物灯“HXP 120” ⑤——显微镜开关阅读全文

posted @ 2023-06-29 16:23 一杯清酒邀明月阅读(667) 评论(0) 推荐(0) 编辑

共聚焦显微镜针孔效应

摘要：共聚焦显微镜针孔效应在操作共聚焦显微镜，或在讨论这种装置的特性和参数时，我们不可避免地提到针孔及其直径。这篇简短的文章是针对那些没有足够时间钻研共聚焦显微镜的理论和细节但又想了解针孔效应的用户们来解释针孔的意义。什么是针孔？基于透镜的光学仪器主要涉及两个参数：透镜曲率和直径。曲率决定了平行光线阅读全文

posted @ 2023-06-27 16:16 一杯清酒邀明月阅读(529) 评论(0) 推荐(0) 编辑

显微镜的光源

摘要：电光源显微镜的照明光源，主要有卤素灯（halogen lamp）、汞灯（mercury vapor arc-discharge lamp）、氙灯（xenon short arc plasma lamp）和发光二极管（light-emitting diodes，LED）等类型。如图1，其中，卤素灯的连阅读全文

posted @ 2023-04-27 14:46 一杯清酒邀明月阅读(668) 评论(0) 推荐(1) 编辑

衍射极限、MTF与像素大小(2)

摘要：一、线对越多，MTF越高，镜头就越好吗？现在来说说第二个问题吧。假设有两个镜头，一个到30lp/mm时，MTF就降到了0.5；而另一个直到60 lp/mm时，MTF才降到0.5。那可不可以说后一个镜头好呢？首先我们来想一下，什么是好镜头呢？从纯技术角度说，就是拍同样的景物，看到的细节比较多的那个阅读全文

posted @ 2023-02-20 10:05 一杯清酒邀明月阅读(733) 评论(0) 推荐(0) 编辑

衍射极限、MTF与像素大小(1)

摘要：关于衍射极限、MTF以及像素大小的问题一直是我的一块心病。说完全不了解，又大概知道这么一回事；可真正要我来讲，却又不能严密而系统地跟别人解释清楚。仿佛就如同梦境里的一个场景，能真真切切看到它的存在，却又难以捉摸，有时跑到跟前细看，又不是那么回事。比如很简单的： 1、已知一个光学系统的F数、光波长，那阅读全文

posted @ 2023-02-20 10:01 一杯清酒邀明月阅读(2029) 评论(0) 推荐(0) 编辑

艾里斑半径公式

摘要：sinθ≈Δθ=1.22λ/d。艾里斑是点光源通过衍射受限成像时，由于衍射而在焦点处形成的光斑。中央是明亮的圆斑，周围有一组较弱的明暗相间的同心环状条纹，把其中以第一暗环为界限的中央亮斑称作艾里斑。艾里斑是以英国皇家天文学家乔治·比德尔·艾里的名字命名的。因为他在1835年的论文中第一次给出了这阅读全文

posted @ 2022-10-20 13:37 一杯清酒邀明月阅读(1425) 评论(0) 推荐(0) 编辑

视觉系统精度的极限艾里斑(airy spot)

摘要：光穿过任何尺寸的孔径时（每个镜头都具有限定的孔径），都会产生衍射由此产生的衍射图案（中心是一块明亮区域，周围是一系列亮度不断降低的同心圆环）被称为艾里斑。 ×××××××××××××××××××××××××××××××××对于我们做机器视觉的来说1）D应该可以等同于光阅读全文

posted @ 2022-10-20 13:35 一杯清酒邀明月阅读(5235) 评论(0) 推荐(0) 编辑

显微镜的景深

摘要：现在常用的是与实验结果比较一致的Berek 公式焦深也叫景深，其定义是：指使用显微镜观察和拍摄样品表面时，从对准焦点的位置开始，改变物镜与样品表面的距离时，对焦能够保持清晰的范围。肉眼的调整能力因人而异，所以焦深也会出现因人而异的情况。现在常用的是与实验结果比较一致的Bere... 焦深也叫景深，其阅读全文

posted @ 2022-07-22 15:03 一杯清酒邀明月阅读(3339) 评论(1) 推荐(1) 编辑

光学显微镜的一些技术参数

摘要：显微镜的重要光学技术参数在镜检时，人们总是希望能清晰而明亮的理想图象，这就需要显微镜的各项光学技术参数达到一定的标准，并且要求在使用时，必须根据镜检的目的和实际情况来协调各参数的关系。只有这样，才能充分发挥显微镜应有的性能，得到满意的镜检效果。显微镜的光学技术参数包括：数值孔径、分辨率、放大率、阅读全文

posted @ 2022-07-22 14:53 一杯清酒邀明月阅读(1344) 评论(0) 推荐(0) 编辑

什么是金相显微镜景深？显微镜景深？

摘要：焦深（depth of focus）又称垂直鉴别率或景深,是指物镜对高低不平的物体能清晰分辨的能力，它与物镜的数值孔径成反比,物镜的数值孔径越大,其焦深越小。在物镜的数值孔径特别大的情况下，显微镜可以有很好的分辨率,但焦深很小。对于金相显微镜来说在高倍放大时，其焦深很小,几乎是一个平面。这也是把金相阅读全文

posted @ 2022-07-22 14:53 一杯清酒邀明月阅读(930) 评论(0) 推荐(0) 编辑

随笔分类 - 显微成像（光学）