摘要: 为了简化问题,假设有3张芯片,每组数有9个探针:Data:2,4,6,7,9,10,4,7,8,39,5,3,2,5,7,9,10,3,126,4,3,2,7,8,1,2,6,9一、给3组数取2的对数Log2Data:1.0,2.0,2.5849626,2.807355,3.169925,3.321... 阅读全文
posted @ 2015-05-22 14:56 洗浄 阅读(1421) 评论(0) 推荐(0) 编辑
摘要: affyPLM包可以对芯片原始数据进行拟合回归,最后得到芯片权重(Weights)残差(Residuals)图、相对对数表达(RLE,Relativelogexpression)箱线图、相对标准差(NUSE,Normalizedunscaledstandarderrors)箱线图以样品GSM28... 阅读全文
posted @ 2015-05-22 14:54 洗浄 阅读(3083) 评论(0) 推荐(0) 编辑
摘要: 一组探针是否能被检测到,可以用检测值来表示。simpleaffy包的detection.p.val方法默认alpha1=0.05,alpha2=0.065。检测值小于alpha1为A(无,Absent),介于alpha1和alpha2之间为M(不确定,MarginalPresent),大于alp... 阅读全文
posted @ 2015-05-22 14:51 洗浄 阅读(438) 评论(0) 推荐(0) 编辑
摘要: RNA降解是影响芯片质量的一个很重要的因素,因为RNA是从5’开始降解的,所以理论5’的荧光强度要低于3’。RNA降解曲线可以表现这种趋势。以样品GSM286756.CEL和GSM286757.CEL为例:library(affy)rawDatatabmax.num891011131415162... 阅读全文
posted @ 2015-05-22 14:40 洗浄 阅读(2631) 评论(0) 推荐(0) 编辑
摘要: 一、大部分的基因都有beta-action基因和GAPDH基因,很多Affymetrix芯片都将它们设为一组观察RNA降解程度的内参基因。mRNA是按照5’至3’的顺序来降解的,通过比较它们3’相对于中间或者3’相对于5’的信号强度,可以很好地指示出试验质量。二、beta-action基因对应的探针... 阅读全文
posted @ 2015-05-22 14:35 洗浄 阅读(1025) 评论(0) 推荐(0) 编辑
摘要: 为了验证杂交的质量,Affymetrix公司加入了两类嵌入探针组:一、poly-A内参:包括lys、phe、thr、dap对应的探针组名称为:AFFX-r2-Bs-lys-3_at、AFFX-r2-Bs-dap-3_at、AFFX-r2-Bs-phe-3_at、AFFX-r2-Bs-thr-3_s_... 阅读全文
posted @ 2015-05-22 14:33 洗浄 阅读(817) 评论(0) 推荐(0) 编辑
摘要: R语言里的image方法可以绘制CEL文件的灰度图像。我们先来讨论image这个的函数:如:x0则R=255,这样就不会超出范围了。这样每个探针都有着对应的灰度了。以左上角为坐标(0,0),给每个探针绘制一个像素,得出了以下这张图:这张图的质量高很多。放大这张图的左上角:“GeneChipHG-... 阅读全文
posted @ 2015-05-22 14:27 洗浄 阅读(813) 评论(0) 推荐(0) 编辑
摘要: 相比DAT文件,网络上更支持CEL级别的文件。CEL已经把DAT图像转换成数据了,而且CEL比DAT所占空间小得多。介绍一下CEL文件的格式,CEL文件有文本文件(TextCelFile,版本3)、BinaryCelFile(二进制文件,版本4)、GenericCelFile(普通文件,版本1)... 阅读全文
posted @ 2015-05-22 14:18 洗浄 阅读(4048) 评论(0) 推荐(0) 编辑
摘要: DAT是芯片的原始扫描图像,如下图:注:这两张图来自《BayesianInferenceforGeneExpressionandProteomics》。A是U95Av2芯片的DAT图像,它包含640*640个特征。B放大了A的左上角,可以看到“GeneChipHGU95A”字样。上图中探针强度越... 阅读全文
posted @ 2015-05-22 14:15 洗浄 阅读(933) 评论(0) 推荐(0) 编辑
摘要: 有一篇文章“Evolvinggene/transcriptdefinitionssignificantlyaltertheinterpretationofGeneChipdata”,提到了“OurresultsdemonstratethattheoriginalAffymetrixprobese... 阅读全文
posted @ 2015-05-22 14:11 洗浄 阅读(1175) 评论(0) 推荐(0) 编辑