蛋白质组学数据处理——搜库

1.前言

       MaxQuant是一款免费的蛋白质组学软件包,由马克斯-普朗克生物化学研究所开发。它内置了自己的搜索引擎Andromeda,可以支持目前主流的蛋白质组学质谱仪厂商产生的原始数据格式。MaxQuant支持标记定量和非标定量,2.0版本后的MaxQuant还支持DIA的数据分析。MaxQuant具备非线性质量校正和Match Between Runs功能,可以增加蛋白鉴定数量和提高定量准确性。下面我们主要以非标定量蛋白质组学(LFQ)数据为例,向大家演示MaxQuant数据库检索的过程。

2. MaxQuant下载安装

 

官网:MaxQuant

https://www.maxquant.org/

MaxQuant下载需要用邮箱注册,并填写注册码。

该软件依赖.NET Framework(基于.net框架编写,有些没安装的电脑需要安装)

解压后无需安装,点击MaxQuant.exe即可使用。

3.操作步骤

3.1上传LC-MS数据即raw data

3.2 上传数据

点击load上传数据,选择数据所在文件夹,选中LC-MS数据,点击 No fraction 设置实验序号,进行下一步

 3.3 参数设置

设置蛋白质是否有修饰,常规无标定量蛋白组学一般不需要修改,直接默认参数就可以

3.4 酶切参数设置

样品在处理时,一般用什么酶做酶切就选择什么酶

 3.5 修改为LFQ

 此外,instrument项中可将Main search peptide tolerate改为10(ppm)

3.6 添加所物种的蛋白质数据库

 3.7 物种蛋白质数据库在uniport上下载

(在本例中以大鼠(Rat)为例)

 

 

 3.8 上传物种蛋白质组学数据库

数据库是随时可能更新的,所以时隔一段时间后所搜得到的结果可能会不一样,属于正常现象

3.9 线程数根据所用电脑的处理器配置进行设置

  点击开始按钮即可开始搜库,等待搜库完成

 3.10 得到搜库结果——proteinGroups文件

 

注:原创文章在公众号:皮蛋笔记,欢迎关注留言交流。

 

posted @ 2024-05-29 13:07  皮蛋笔记  阅读(92)  评论(0编辑  收藏  举报