浓盐法提取DNA

原理

核酸和蛋白质在生物体中常以核蛋白(DNP/RNP)的形式存在
 DNP 能溶于水及高浓度盐溶液，但在 0.14 M 的盐液中解度很低，

 RNP 则可溶于低盐溶液，因此可利用不同浓度的 NaCl溶液将其从样品中分别抽提出来
DNA 和蛋白质，用将抽提得到的 DNP 用 SDS 处理可将其分离DNA 上清，加入冷乙醇即可将其氯仿 -异戊醇将蛋白质沉淀除去可得呈纤维状析出。

 

操作;

1. 称取一定质量的猪肝，加入2倍肝重的0.1mol/L NaCI-0.05mol/L 柠檬酸钠缓冲液并用匀浆器磨碎(已完成)
2.提取 DNA
　　量取肝糜 4 ml于 10 毫升离心管，在 4000r/min 下离心 10min ,沉淀中再加入8ml缓冲液于 4000r/min 离心5min ;
　　弃上清，取沉淀;
　　将沉淀用 10 ml 柠檬酸钠缓冲液完全洗入干净的小烧杯、 加入 5ml氯仿-异戊醇混合液、1mISDS，振荡 30min (保鲜膜封口);
　　缓慢加入固体 NaCl (约 0.9g )，使其最终浓度为 1mol/L ;

　　将溶液分装到2个10 毫升离心管中，在4000r/min 离心5 min，
　　取上清水相;在上述水相溶液中分别加等体积冷95% 乙醇，边加边用玻棒慢慢朝一个方向搅动，将缠绕在玻棒上的凝胶状物用滤纸吸去多余的乙醇，即得 DNA 粗品