[生命科学] 生物基础实验之DNA提取
生物基础实验之DNA提取实验
基因组DNA的提取通常用于构建基因组文库、Southern杂交(包括RFLP)及PCR分离基因等。利用基因组DNA较长的特性,可以将其与细胞器或质粒等小分子DNA分离。
总体流程图如下。本人实际操作流程和图片步骤有些许出入。
实验步骤 1
先找到植物(以拟南芥为例),标记目标植株。摘取嫩叶一片放入离心管中,用机器把叶片打碎。如下面三张图所示。
实验步骤 2
在打碎叶片的试管中后加入300ul DNA extraction buffer。 然后冲洗棒头后,提取其他样品。
实验步骤 3
放入离心机中12000,离心10min。
实验步骤 4
转移上清液到新的离心管中,加等体积的异丙酮,上下摇晃5次。
实验步骤 5
放入-20度的冰箱10min以上。
实验步骤 6
放入离心机12000转速,10min。
实验步骤 7
弃上清液,加入1ml 70%酒精
实验步骤 8
放入离心机12000转速,10min。
实验步骤 9
倒掉酒精,晾干沉淀物。
实验步骤 10
晾干后加50μL超纯水。
当DNA实验提取完后,可以放入超微量分光光度计NanoPhoto中查看DNA提取浓度,以蒸馏水为对照,当数值大于50时说明提取成功,小于50说明提取失败。
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