转录组数据分析项目方案的流程
数据准备和质量控制
对原始数据进行质量控制,包括检查质量值、长度、GC含量等。
对原始数据进行去除低质量reads,过滤低复杂度reads,去除adapter序列等预处理。
序列比对和基因计数
使用HISAT2等工具将去除低质量和过滤后的reads比对到人类基因组上。
使用featureCounts或HTSeq等工具进行基因计数,计算每个基因的表达量。
差异表达分析
使用DESeq2或edgeR等工具,对基因计数矩阵进行差异表达分析,比较样本组之间的基因表达量差异。
确定差异表达基因列表和表达模式。
功能分析和可视化
对差异表达基因进行功能分析,包括GO富集分析、KEGG富集分析、基因本体分析等。
对差异表达基因进行数据可视化,包括基因表达热图、PCA分析、基因表达箱线图等。
结果报告
生成差异表达分析结果报告,包括差异表达基因列表、富集分析结果、生物学意义分析、可视化结果等。
汇总分析结果,进行结果解释和讨论。