同源序列比对和进化树的绘制(转)
转自:果子学生信 微信公众号
题目:结合本研究领域,利用核酸(NCBI、EMBL和DDBJ)和蛋白质(SWISSPROT)找出你感兴趣的基因或蛋白质,并找出其同源的基因或者蛋白,分析它们的进化历史
解答:
1.找出感兴趣基因或蛋白的序列
2.找出其同源的基因或蛋白
3.净化分析
如何获取感兴趣的基因(蛋白、miRNA、lncRNA等):1.移植性研究,看文献,移花接木;2.原创性研究,前期芯片和测序的结果,筛选出差异基因;3.数据库挖掘,找别人数据里面潜在的信息;4.合作。
本课程的示例蛋白:APOBEC3A
1.得到上一期课程中查询得到的该蛋白质的序列
>AKE33285.1 APOBEC3A [Homo sapiens]
MEASPASGPRHLMDPHIFTSNFNNGIGRHKTYLCYEVERLDNGTSVKMDQHRGFLHNQAKNLLCGFYGRH
AELRFLDLVPSLQLDPAQIYRVTWFISWSPCFSWGCAGEVRAFLQENTHVRLRIFAARIYDYDPLYKEAL
QMLRDAGAQVSIMTYDEFKHCWDTFVDHQGCPFQPWDGLDEHSQALSGRLRAILQNQGN
2.搜索同源蛋白
1.进入NCBI,使用网页版BLAST工具
2.选择功能
3.填写参数,运行
4.基本解释:从上到下依次是:基本情况、保守区域、图形展示、比对的同源序列和得分、
5.选前30条结果,做多重比对
6.下载保存
3.画出进化树
1.下载安装MEGA
4.第一个按钮是序列比对的结果,我们选择做进化树,选第二个 neighbor joining
5.结果就出来了
6.美化结果
附录:
常见的建树方法
建树的功能
- 推断基因/蛋白的功能
- 基因/ 蛋白家族分类
- 计算基因分化的年代