质粒 | 细胞转染 | 质粒转染
转基因（细胞和基因治疗）的基本技术
问题：
- 什么是质粒？Plasmid，质粒是裸露的环装DNA
- 什么是细胞转染、质粒转染？
- 什么是GMP质粒？国内有哪些公司有能力生产GMP质粒？
- 质粒是如何高质量批量生产的？质粒生产的成本和瓶颈是什么？
- 质粒的特性？质粒的承载能力是多少？多个质粒的兼容性？
什么是质粒？
What is a Plasmid? - Plasmids 101
要点：
- 在细胞的染色体或核区DNA之外，能够自主复制的DNA分子（字源：plasm为生殖质，-id表示粒）。
- 质体不是细胞生存所必需，却可以赋予细胞额外的功能
- 大部分的质体都是环状分子，但是也有少数属于线状分子
- 存在于许多细菌以及酵母菌等生物中，乃至于植物的线粒体等胞器中
- DNA长度从数千碱基对至数十万碱基对都有
质粒的基本结构图：
什么技术里面会用到质粒？
- 基因的载体 vector
- 转基因时会用到
什么是细胞转染、质粒转染？
细胞转染
转染是将DNA、RNA或蛋白质引入真核细胞的过程，用于研究和调节基因表达。因此，转染技术作为分析工具，有助于表征遗传功能、蛋白质合成、细胞生长和发育。转染分析不仅可以促进细胞研究的进步，还可以加强药物研发策略。诸如病毒转染或病毒转导等类似策略则是利用慢病毒微粒将外源性物质插入到真核细胞中。而细菌转化则是细菌摄入外源性基因材料的水平基因转移过程。
术语：
- 转染（英语：Transfection）是刻意将外源遗传物质（DNA或RNA，裸核酸或纯化核酸）植入真核细胞的一种过程；此术语用来描述非病毒媒介的基因克隆方式，以及动物细胞进展到癌变状态。
- 转化（英语：transformation，又译“转形”）则更常用于细菌和植物细胞中的非病毒DNA转移。
- 转导（英语：Transduction）是指以病毒媒介的基因克隆至真核细胞的方式。
转染方法：
- 物理
- 化学
- 生物技术
质粒转染
为通过转染方法实现高效的基因转移，质粒DNA可与脂质体试剂结合来提高基因进入细胞核的递送效率。这一过程对于后续目标基因蛋白表达必不可少。质粒是在细菌之中天然形成的小型环状DNA分子，被细菌用来传递基因信息。将质粒DNA加入到哺乳动物细胞的机制被称为质粒转染
什么是GMP质粒？国内有哪些公司有能力生产GMP质粒？
GMP標準(Good Manufacturing Practice)
GMP是英文 GOOD MANUFACTURING PRACTICE 的缩写，中文含义是“良好生产规范”。世界卫生组织将GMP定义为指导食物、药品、医疗产品生产和质量管理的法规。
国内代工Top公司：
- 生基医药（药明康德旗下）- 质粒DNA生产平台
- 和元生物 - 质粒生产
- 金斯瑞蓬勃生物 - 质粒临床级GMP生产
- 其他科技服务公司
质粒是如何高质量批量生产的？质粒生产的成本和瓶颈是什么？
基因工程的范畴，纯技术
质粒的特性？质粒的承载能力是多少？多个质粒的兼容性？
质粒的拷贝数 - 一个细菌里有多少个质粒
质粒的不相容性 - 一山容不下二虎
质粒的承载能力 - 10kb
