GSEABase | clusterProfiler | GSEA富集分析 | MSigDB

 

2023年09月01日

log2FC <- log2(rowMeans(TPM[,high.samples])+1) - log2(rowMeans(TPM[,low.samples])+1)
geneList <- log2FC
geneList <- sort(geneList, decreasing = T)
egmt <- clusterProfiler::GSEA(geneList[geneList!=0], TERM2GENE = geneset, minGSSize = 1,
                              pvalueCutoff = 1, nPermSimple = 10000, verbose = F)
options(repr.plot.width=8, repr.plot.height=4)
enrichplot::gseaplot2(egmt, geneSetID = "Enterocyte-marker genes (Haber et al., 2017)",
                      pvalue_table = T, subplots = 1:2, ES_geom="line", color = "red")

 

term gene
gene set name gene name

 

2023年08月22日

美图参考：http://localhost:17435/notebooks/data_center/DB/DB-TCGA-CCLE-GTEx.ipynb

 

2022年10月07日

用MSigDB的数据集来做GSEA分析，这是常规可靠的分析，能上CNS。

最常见的第一种hallmark数据集

第二种就是GOBP

参考：Data_center/analysis/ApcKO_multiomics/3.DEG_pathways.ipynb

注意数据集需要clean，基因个数不能少于5，否则没有富集得分，程序会报错。

 

核心的函数是

tmp.NES <- clusterProfiler::GSEA(geneList2, TERM2GENE = gmt.list[[j]], 
                                             minGSSize = 1, pvalueCutoff = pvalueCutoff, verbose = F)

　　

MSigDB可以用msigdbr来读取

h.gmt <- msigdbr(species = species, category = "H") %>%
            dplyr::select(gs_name, gene_symbol) # entrez_gene

msigdbr_collections()

 

参考：

 

 

2022年09月07日

太厉害了，可以做自定义的gene set的GSEA分析。

参考：

结果非常好，是可以发CNS的水平。

 

 

2022年08月31日

参考：手把手教你用R做GSEA分析

参考：Data_center/analysis/Perturb_seq_Sethi/cellranger/DEG_pathway.ipynb

其实我很早之前就写了个gsea的函数，也是用clusterProfiler来做，但是貌似结果都不是很理想，老板也不爱用这个分析，所以我也就一直没用。

今天看着别人的代码，把自己的函数又重新调整了一下。

 

 

 

参考：生信技能树 - 代码有所更新 

获取单细胞测试数据

# devtools::install_github("satijalab/seurat-data")

library(SeuratData)

# AvailableData()

# InstallData("pbmc3k.SeuratData")

data(pbmc3k)

exp <- pbmc3k@assays$RNA@data

dim(exp)

# exp[1:5,1:5]

table(is.na(pbmc3k$seurat_annotations))

table(pbmc3k$seurat_annotations)

library(Seurat)

pbmc3k@active.ident <- pbmc3k$seurat_annotations

table(pbmc3k@active.ident)

deg <- FindMarkers(pbmc3k, ident.1 = "Naive CD4 T", ident.2 = "B")

# head(deg)

dim(deg)

　　

GSEA分析

# if (!requireNamespace("BiocManager", quietly = TRUE))
#     install.packages("BiocManager")

# BiocManager::install("GSEABase")

library(GSEABase)
library(ggplot2)
library(clusterProfiler)
library(org.Hs.eg.db)

# API 1
geneList <- deg$avg_logFC
names(geneList) <- toupper(rownames(deg))
geneList <- sort(geneList, decreasing = T)
head(geneList)

# API 2
# gmtfile <- "../EllyLab//human/singleCell/MsigDB/msigdb.v7.4.symbols.gmt"

gmtfile <- "../EllyLab//human/singleCell/MsigDB/c5.go.bp.v7.4.symbols.gmt"

geneset <- read.gmt(gmtfile)

length(unique(geneset$ont))

egmt <- GSEA(geneList, TERM2GENE = geneset, minGSSize = 1, pvalueCutoff = 0.99, verbose = F)

# head(egmt)

gsea.out.df <- egmt@result

# gsea.out.df

# head(gsea.out.df$ID)

library(enrichplot)

　　

出图 - 基因数据足够才够漂亮

options(repr.plot.width=6, repr.plot.height=4)
gseaplot2(egmt, geneSetID = "GOBP_ANTIGEN_RECEPTOR_MEDIATED_SIGNALING_PATHWAY", pvalue_table = T)

　　

 

原始的图不够漂亮，优化可以参考阿汤哥的paper

这个图的代码不错，不知道他们paper里有没有分享。

2019 - Single-cell RNA-seq analysis reveals the progression of human osteoarthritis

 

posted @ 2021-05-11 12:32  Life·Intelligence  阅读(3199)  评论(0)  编辑  收藏  举报
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