eQTL | Expression quantitative trait loci | 表达数量性状基因座 | QTL | 数量性状位点

到底什么是eQTL？

eQTL和QTL之间有什么联系？为什么说QTL比eQTL难很多？

QTL和GWAS有什么关系？

GTEx数据库里的eQTL数据如何利用？

说eQTL之前必须先解释QTL，QTL，一说到中文名就清楚了，数量性状位点，就是一个性状，比如身高，会由成百上千个基因来决定，目的简单明确，那么我们如何找到这些位点呢？

Quantitative Trait Locus (QTL) Analysis - 来自nature的介绍

实现层面，其实研究的不是基因，而是染色体上的区段，更明确的说就是分子标记，SNP最流行，大学里还学过很多烦人的分子标记。

关联是关键，association，基本假设就是遗传片段会跟表型一起分离。

通常极少数的loci具有很高的effect size。

选择足够纯的亲代（需要有基因型和表型的差异），然后不断杂交，后代的基因型和表型会不断的分离重组。

然后对基因组的每个位点做统计检验，得出likelihood ratio，从而得出初略的位点信息。

再最后用分子生物学的方法来narrow down有效区域。

想彻底理解背后的统计学思路还得好好啃几篇paper。

空说空看是不可能学扎实的，所以废话不多说，开始用R实操吧，在分析中你会理解越来越多的概念。

R/qtl: A QTL mapping environment

先装个包，然后library("qtl")

载入数据：data(hyper)

先看看genotype的数据：

行代表样品，也就是一个小鼠，列代表了marker，右边列出来的是marker在1号染色体上的位置cm。

0、1、2分别代表什么；0代表两个都是reference allele；1代表一个是reference allel、一个是alternative allele；2代表两个都是alternative allele。

这个要注意，由于真核大多都是非单倍体，所以通常都有2个或多个等位基因；但是参考基因组里只有一套等位基因，那个就是reference allel；如果要考虑多个等位基因，或者考虑haplotype则要做phasing。

再看看phenotype的数据：

可以看看油管的视频：Using R/qtl to analyze QTL data

可视化数据：

第一个图黑色代表缺失值，

最终我们会得到什么结果呢？

听过飞哥对eQTL的解释，就是相当于把每个基因的表达数据当做是一个phenotype，然后做关联分析，看哪些snp对基因的表达产生影响。

If a given genotype affects (decreases or increases) gene expression at the same locus of the genotype, it's called cis eQTL, if it affects expression at a different locus, trans eQTL.

An eQTL is a locus that explains a fraction of the genetic variance of a gene expression phenotype.

下图是一个典型的eQTL位点，它是在TSS两侧1M区间内，叫做cis-eQTL，下图可以看出三种基因型下表达有显著差异，表明该位点对基因表达有显著影响。

通常我们的说法是这个gene有哪些eQTL位点，通常只需要100个个体就可以了。trans eQTLs要难找得多，因为算法上需要扫描整个基因组区域。

做遗传都知道，做什么都要先把population考虑进去。17 per cent of genes were differentially expressed between populations。GxE互作也是老生常谈。

population minor allele frequency

为什么eQTL必须分组织来分析，因为gene expression signatures are cell-type specific。

cis eQTLs are cell-type specific，所以以上的话需要修正为“这个gene在这个组织里有哪些eQTL位点”。

这就表明某些snp只会影响某些特定的组织，以及致病。

These observations certify the importance of integrating data from a relevant tissue when trying to interpret GWAS results using gene expression as an intermediate phenotype.

An important caveat is that in several cases the same regulatory region and variant will be linked to one gene in one tissue and another gene in another tissue

Expression quantitative trait loci: present and future

看下GTEx数据怎么利用，GTEx Portal: Introduction to the Gene eQTL Visualizer

Genotype-Tissue Expression - GTEx Portal官网里面都是cis-eQTL

输入一个基因后，会有一个主表出现，相当于heatmap，行是组织，列是eQTL，里面点的颜色代表NES，The size and color of the bubble represent the p-value and NES (normalized effect size) of the eQTL。

拖动上面的框到中间就会看到TSS和TES，底下的被蓝色框起来的灰色框代表了exon区域。