Alterations in the Glycan Profile of Mouse Transferrin: New Insights in Collagen-Induced Arthritis （小鼠转铁蛋白糖谱的改变：胶原蛋白诱导关节炎的新发现）

文献名：Alterations in the Glycan Profile of Mouse Transferrin: New Insights in Collagen-Induced Arthritis（小鼠转铁蛋白糖谱的改变：胶原蛋白诱导关节炎的新发现）

期刊名：J Proteome Res

发表时间：（2020年4月）

IF：3.78

单位：西班牙巴塞罗那大学营养与食品安全研究所

物种：小鼠

样品类型：血清

技术：糖型研究

 

一、 概述：（用精炼的语言描述文章的整体思路及结果）

采用优化免疫亲和层析（IAC）的方法，从小鼠血清中分离纯化转铁蛋白，研究其在骨胶原诱导的关节炎（CIA）样本中糖型的改变。然后采用同位素标记苯胺的方法对小鼠转铁蛋白（Transferrin, Tf）的不同糖型进行相对定量，用于明确CIA小鼠的糖型变化。此外，还通过多元数据分析，确定可以区分疾病样本的糖型。PLS-DA结果显示15个糖型中，有5个可能是CIA的潜在标志物。大部分对应于高唾液酸化结构（H6N5S3_2, H6N5S3_3, and H5N4S3_2）。此外，H6N5S2和H6N5S3_2糖型与CIA的进展相关。文章建立的方法不仅为寻找CIA的糖基生物标志物提供了有价值的信息，而且为今后评估许多其他炎症疾病的糖基化变化打开了大门，其中Tf的改变已经被描述。

 

二、 研究背景：（简要介绍研究进展动态、研究目的和意义）

血清蛋白糖基化的变化是许多疾病（包括炎性关节病）细胞改变的早期指标，为疾病的诊断和疾病进展提供了良好的基础。转铁蛋白（Transferrin, Tf）是一种阴性的急性期蛋白，其主要作用是通过血浆运输铁。在许多炎症性疾病，如类风湿关节炎(RA)中，已发现Tf的唾液化、岩藻糖化和糖链分支发生变化。CIA是一种常被研究的自身免疫性关节炎小鼠模型，在病程、组织学发现以及对常用抗关节炎药物的反应方面与人类RA非常相似。本课题组前期工作采用毛细管液相色谱-质谱法对小鼠转铁蛋白(mTf)进行糖肽水平的分析。该研究表明，在CIA存在的情况下，mTf糖肽被修饰，主要观察到糖基化和糖链分支的增加。然而，糖肽方法没有提供关于糖链结构改变的信息。

 

三、实验设计：

 

 

 

四、研究成果：（重点图表展示）

1、CIA样本中糖链异构体分析。首先建立mTf的参考糖谱。可以看出，大多数糖链含有双天线结构，其中以H5N4S2最为丰富。其中一些被岩藻糖化了，尽管它们的强度不如非岩藻糖化的。然而，在这项工作中没有发现四天线结构，可能是由于它们的低丰度。另一方面，mTf糖链中存在的所有唾液酸都是N-糖基神经氨酸(NeuGc)。

图1 在优化的条件下，用亲水性质谱法提取了对照小鼠血清中含量最多的mTf糖基异构体。

2、为了明确地测定病理标本中mTf聚糖过表达，我们使用了一种采用同位素标记苯胺的方法对糖链进行同位素标记（GRIL）。对3个独立对照小鼠血清样本（n=3）进行IAC纯化，然后分别进行标记，确认该方法的重现性，技术重复CV≤6%。4只未免疫组，5只临床评分不同的CIA小鼠血清样本进行分析。 PLS-DA结果显示15个糖型中，有5个可能是CIA的潜在标志物。大部分对应于高唾液酸化结构（H6N5S3_2, H6N5S3_3, and H5N4S3_2）。

图2 PLS-DA的VIP得分

 

 

五、文章亮点（结论讨论）：

 

 

阅读人：李巧珍