基因编辑学习

 

 

 

 

 

中科院植物研究所研究员刘春明团队与合作者开发出一个简便高效的多基因编辑工具包Customized Assembly and Simplified Editing（CASE）

gRNA克隆载体和Transgene Killer Construct（TKC）编辑载体进行了优化改造，同时结合此前由tRNA间隔实现gRNA串联的方法，建立了一个创制多突变体的简便高效的CASE工具包。

sgRNA 表达框
PKSE401 表达载体

 

 

 

pKSE401 载体含有由 AtU6 启动子驱动的 g RNA 插入位点和 sgRNA scaffold（骨架），以及由 2x  CaMV  35S 启动子驱动的 Cas9，载体上无荧光蛋白和 GUS 筛选标记。

https://www.addgene.org/62202/

Growth in Bacteria

• Bacterial Resistance(s)
  Kanamycin
• Growth Temperature
  37°C
• Growth Strain(s)
  DH5alpha
• Copy number
  High Copy

pKSE401 重组载体的构建;只需将靶标位点 DNA 序列两端添加接头后合成，并连接到载体的 gRNA 插入位点上，即构建好重组的 pKSE401 载体