酵母单杂交 (Y1H) 试验

 

1.叶绿素荧光参数:Fv/Fm反映植物的潜在最大光合能力

 

2. 酵母单杂交:是研究DNA与蛋白质之间的关系

将编码待测蛋白和AD的融合载体导入细胞,如果靶蛋白与顺势作用元件结合,那么报告基因表达。

 

 诱饵是启动子,想找上游调控蛋白,猎物是蛋白

将编码待测蛋白和AD的融合载体导入细胞,如果靶蛋白与诱饵结合,那么报告基因表达。

 

 

3.motif:真核生物基因在无转录因子时处于不表达状态,只有转录因子结合到识别DNA序列上后,基因表达。转录因子结合在基因的启动子区域,启动转录。

 转录因子的结合位点:与转录因子结合的DNA(motif)

 

 

 

 4.pAbAi
pAbAi pBait-AbAiY1Hgold
AbAr使
AAureobasidinAAbAAureobasidium pullulans No.R106
力。

5.酵母选择性营养缺陷型培养基

缺陷培养基(SD一缺二缺三缺四缺五缺培养基)的配方,就是在完全培养基的配方上去除对应的缺陷型组分。

 6.凝胶迁移或电泳迁移率实验 (EMSA)

研究核酸与蛋白质相互作用的技术。当蛋白与特异性DNA或RNA结合后,其在凝胶中的迁移率将小于未结合蛋白的核酸。

7.染色质免疫沉淀 (ChIP) 测定

体内研究核酸与蛋白质相互作用的技术。

8.双荧光素酶

荧光素酶与底物结合发生化学发光反应。

9.修改图片中的字

AI

10双荧光素酶 (LUC) 测定

酶的亮度与基因的表达水平有关。

荧光素酶(Luciferase)是生物体内催化荧光素(luciferin)或脂肪醛(firefly aldehyde)氧化发光的一类酶的总称。荧光素酶是靠酶和底物的相互反应发光

 双荧光素酶报告基因检测系统在原有的基础上引入了海肾报告基因,可以排除不同组之间细胞生长状况细胞数目以及转染效率带来的干扰,起到校正的作用,从而使实验结果更为可靠

两者可催化各自的底物发生氧化作用产生生物荧光,产生的荧光数值大小即表示了两种酶的表达量多少。

Firefly luciferase和Renilla luciferase之所以被称为报告基因,是因为在基因表达调控研究时,利用两者表达产生的荧光比值可以监控证实微观层面上的分子间的相互作用。具体做法是:将靶基因的转录调控元件或5’启动子区克隆在Firefly luciferase基因的上游

 

 

 

 

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